超微量分光光度計利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析,其設(shè)計使得它能夠在微量樣品(如0.5~2ul)的條件下進行高精度的測量。這使得它在現(xiàn)代分子生物實驗室中成為常規(guī)儀器,適用于核酸、蛋白質(zhì)和細菌生長濃度的定量分析。
超微量分光光度計主要用于測量微量的物質(zhì)濃度或化學(xué)反應(yīng)速率。它的主要作用包括:
測定物質(zhì)濃度:通過測量溶液對特定波長光的吸收來計算物質(zhì)濃度,具有高精度和低檢測限,可以檢測低濃度的物質(zhì)。
物質(zhì)特性分析:通過測量物質(zhì)在不同波長下的吸收光譜,分析物質(zhì)的特性和結(jié)構(gòu),通過與已知的化合物光譜比較,可以確定物質(zhì)的類型和組成。
反應(yīng)動力學(xué)研究:用于研究化學(xué)反應(yīng)的動力學(xué)過程,通過監(jiān)測反應(yīng)過程中物質(zhì)濃度的變化,可以推算出反應(yīng)速率常數(shù)、反應(yīng)機理等信息。
細胞和生物分子檢測:用于檢測細胞和生物分子,如蛋白質(zhì)、DNA、RNA等,通過測量這些生物分子的吸收光譜,可以評估其含量和純度。
藥物研發(fā):在藥物研發(fā)領(lǐng)域,超微量分光光度計常用于藥物的分離、純化、分析,可以測量蛋白質(zhì)、糖類、脂肪等物質(zhì)的濃度,為產(chǎn)品質(zhì)量控制提供依據(jù)。
此外,超微量分光光度計還廣泛應(yīng)用于科研、化學(xué)、環(huán)境保護、食品工業(yè)等多個領(lǐng)域。在生物學(xué)研究中,它常用于蛋白質(zhì)組學(xué)、基因表達分析、細胞培養(yǎng)監(jiān)測等;在化學(xué)領(lǐng)域,用于有機化合物、無機化合物的分析;在環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域,用于檢測水體、土壤、空氣等環(huán)境樣品中的有害物質(zhì)。
超微量分光光度計通過測量樣品在特定波長下的吸光度來定量樣品中的物質(zhì)。它使用紫外可見光作為光源,通過分光系統(tǒng)將光分散成不同波長的單色光,然后測量樣品對單色光的吸收情況。根據(jù)比爾-朗伯定律(Beer-Lambertlaw),吸光度與樣品中物質(zhì)的濃度成正比,從而可以計算出樣品的濃度。